手把手教学——酵母双杂交(Y2H)实验操作指南
DNA-BD)和活化域AD融合,使其在约束条件下相互结合形成蛋白质复合物,并驱动酵母细胞中的报告基因的表达。因此,双杂交系统主要用于发现蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系。酵母单杂交系统和双杂交系统的原理和应用范围存在明显的差异,需要根据具体的研究课题选择合适的技术来完成实验。
HE实验的优点在于方法简单、使用灵活、效果可靠。比较常用的有Y2H(酵母双杂交实验)、Co-IP(免疫共沉淀实验)等。Y2H实验通常用于筛查蛋白质间的相互作用,Co-IP实验则用于检测已知的蛋白质复合物。在具体操作中,也可根据需求进行改变,例如添加化学标记,以方便后续的标记或纯化等。